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蛋白表达大肠表达

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沈阳莫德医药科技有限公司

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产品说明

       酵母表达系统是一种最经济高效的真核蛋白表达系统,可以成功实现胞内表达或是分泌表达,且其放大培养基相对廉价,培养条件要求不高,适宜工业放大。与哺乳动物细胞表达系统一样,酵母蛋白表达系统能够对所表达蛋白进行例如糖基化、酰基化、脂基化、磷酸基化等保证蛋白天然构象的修饰,可用于制备非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。


  酵母蛋白表达平台由多年从事酵母表达操作的实验人员组成,经验丰富,采用自行改造的高效分泌载体和宿主组合,可在最大程度上实现最高质量的蛋白表达。经客户反馈,以我平台所制备的蛋白原料为抗原所制备的单抗均具有很好的识别天然蛋白的优良特性。


1、专利的Biobrick技术,可以实现高效体外构建任意拷贝的基因剂量,实现表达量的提高,可成功用于工业菌种的改良优化。
2、采用自行改造的高效分泌载体:pPIC9K、pPIC9K高效融合载体、pPICZA、pGAPZa、pPaSUMO3,宿主GS115、KM71、X33的正交组合。PINK系统优化分泌表达信号肽。胞内表达采用自行改造的载体pPIC 3.5k载体和宿主GS115、KM71、X33的组合,可在最大程度上实现表达。
3、高效的种子筛选工作能使您所定制的蛋白在最短的时间内获得尽可能高的产量。

客户提供

目的蛋白信息或基因序列,质粒(也可以选择由金开瑞提供);
蛋白询价信息表(请点击下载中心,下载蛋白询价信息表后详细填写)。

最终交付

纯化后蛋白纯品、表达菌株(收费);
蛋白表达结题报告,包括测序报告、实验条件、蛋白表达纯化检测结果。

案例1:经济型套餐
  以下是通过我平台自行改造的pPIC9K载体和GS115宿主系统成功表达一种酶的经济型套餐实例。自接到订单至成功表达只用了20个工作日,亲和层析一步纯化得到蛋白纯度在95%以上。

Fig. A: Expression and secretion of enzyme protein from P.pastoris
Lane 1: Total protein of recombinant clone
Fig. B: Purification of the target enzyme protein
Lane 1: Purified enzyme protein


案例2:标准型套餐
  以下是一个需要做优化表达的标准型订单服务,客户要求表达一种药用蛋白,最后做工艺放大,对表达量有一定的要求,客户自己做了大量的工作仍未提高表达量,我们从上游开始进行表达优化,历经50个工作日,用我平台自己改造的pPIC9K载体和KM71H宿主在2.5 mg/mL的G418浓度下获得一株令客户满意的工艺放大种子。

Fig C: Expression and secretion of pharmaceutical protein from P.pastoris
Lane 1: Expression level from customer
Lane 2: Expression level from Genecreate
Lane 3: Negative control
Fig. D: Purification of the target pharmaceutical protein by SP-Sepharose
Lane 1: Purified enzyme protein


案例3:
  以下是我平台成功完成的一个工业酶菌种对产量的优化提高工作,利用Biobrick专利技术由单拷贝基因剂量构建到8拷贝的基因剂量,历经近60个工作日,将酶的表达量由开始的0.5 g/L的水平提高到2.4 g/L的水平,提高了近5倍。

Fig. E: single copy gene expression of industrial enzyme from P.pastoris
Lane 1: Expression level from single copy gene expression
Fig. F: eight copy gene expression of industrial enzyme from P.pastoris
Lane 1: Expression level from eight copy gene expression


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